本发明提供了一种基于多肽?锰?羰基复合物的CO释放分子的固相合成方法及其应用。本方法采用Fmoc固相多肽合成法，在需引入侧链修饰的位点使用侧链Alloc保护的赖氨酸，从C端到N端依次缩合Fmoc保护氨基酸，得到侧链带有Alloc保护的多肽氨基树脂；进行树脂上的Alloc基团脱除，暴露可用于修饰反应的自由氨基；在树脂上采用还原胺化反应，将树脂上多肽链上的自由氨基修饰为可进行化学配位的配体基团；加入五羰基溴化锰进行树脂上的化学配位；最后将目标多肽从树脂裂解下来并纯化，即可得到带有锰?羰基配位的多肽。本发明有助于研究一氧化碳对特定部位的生理生化作用，同时为一氧化碳在相关疾病的治疗方面奠定良好基础。